期刊简介

               本刊是昆明医学院主办,云南省教育厅主管的综合性学术期刊,为季刊、国内外公开发行。本刊主要报道我省及我院基础医学、临床医学、药学、预防医学领域的最新研究成果,辟有论著、综述、个案报道、短篇报道及经验交流等栏目,旨在促进医学信息交流,为发展祖国的医药卫生事业服务。                

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  • 杂志名称:昆明医科大学学报杂志
  • 主管单位:云南省教委
  • 主办单位:昆明医学院
  • 国际刊号:1003-4706
  • 国内刊号:53-1221/R
  • 出版周期:月刊
期刊荣誉:全国优秀科技期刊期刊收录:维普收录(中), 统计源核心期刊(中国科技论文核心期刊), 万方收录(中), CA 化学文摘(美), 上海图书馆馆藏, 知网收录(中), 国家图书馆馆藏
昆明医科大学学报杂志2013年第10期

pSIREN-HIF-1α/shRNA表达载体的构建与鉴定

赵留芳;张书萍;李晓江;任艳鑫;张康;喻博;马静;隋军

关键词:RNA干扰, 鼻咽癌, 质粒, HIF-1α, 短发卡RNA
摘要:目的:构建pSIREN-HIF-1α/shRNA重组质粒并测序鉴定,为下一步探索鼻咽癌基因治疗的RNA干扰(RNA interference, RNAi)途径奠定基础。方法根据基因库 HIF-1αcDNA 序列(NM_001530/NM_181054)以及Reynolds设计原则,设计并合成两端有酶切位点的60个碱基的寡核苷酸链,退火成互补双链后将退火产物与RNAi-Ready pSIREN-RetroQ-ZsGreen载体链接后,热转化至大肠杆菌JM109菌株中,提取质粒进行1%琼脂糖凝胶电泳鉴定,测序分析。结果 PCR扩增片段出现约470 bp大小的目的基因条带,与预期结果相符;凝胶电泳证实重组载体构建成功,插入片段测序结果与合成的寡核苷酸序列一致。结论成功构建重组质粒pSIREN-HIF-1α/shRNA,为下一步用脂质体包装并转染鼻咽癌细胞的研究奠定基础。